18221656311
18221656311
聯(lián)系人：錢經(jīng)理
電 話：18221656311
手 機：18221656311
地 址：上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園B座
郵 編：200093
傳 真：021-64881400
郵 箱：2885617636@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c58469/
手機網(wǎng)站：m.hybiosh.com
閱讀次數(shù)：1478 發(fā)布時間：2012/9/19 8:33:45
一、組織抽提：1. 取組織塊50-100㎎用液氮在研缽中研磨成粉末2. 移入玻璃勻漿器加入1ml Trizol 抽打勻漿3. 移入1.5ml新離心管用5 ml針頭抽打4. 冰上孵育5分鐘5. 離心12,000g 4℃ 5分鐘取上清液移入1.5ml新離心管6. 加0.2 ml氯仿，震蕩，冰上孵育5分鐘7. 離心<12,000g 4℃ 10分鐘取上層液相移入1.5ml新離心管8. 加0.5 ml異丙醇，震蕩，冰上孵育5分鐘9. 離心<12,000g 4℃ 5分鐘棄去上清液10. 加入1 ml 75%乙醇，震蕩11. 離心<7,500g 4℃ 5分鐘棄去上清液12. 室溫下使之變透明13. 加入DEPC處理水10μl －－35μl 溶解RNA（可保存在液氮或低溫冰箱）14. 走RNA變性電泳觀察18s，28s條帶，分光光度計檢測260/280吸光度比值，計算RNA濃度 二、RT反應體系（步）：約20分鐘
RNA 抽提物 5μl Radome引物 2μl RNA sin 0.5μl
| RNA sin | 0.5μl |
| 10mM dNTP | 1μl |
| 5×RT 緩沖液 | 4μl |
| 25mM MgCl2 | 4μl |
| AMV 逆轉錄酶 | 3μl |
| 25mM MgCl2 | 2μl |
| 10×PCR 緩沖液 | 5μl |
| 10mM dNTP | 1μl |
| 上下游引物10pmol/μl | 2.5μl×2 |
| CDNA模板 | 2.5μl |
| ddH2O | 34μl |
| Taq酶 | 0.5μl |
| 輕質石蠟油 | 50μl |
| | 100μl |
| 25mM MgCl2 | 3μl |
| 10×PCR 緩沖液 | 5μl |
| 10mM dNTP | 1μl |
| 上下游引物10pmol/μl | 2.5μl×2 |
| CDNA模板 | 5μl |
| ddH2O | 30μl |
| Taq酶 | 1μl |
| 輕質石蠟油 | 50μl |
| | 100μl |
上海恒遠生物科技有限公司主要經(jīng)營的產(chǎn)品有elisa試劑盒，生物試劑，標準品，血清，抗體，培養(yǎng)基，細胞，歡迎各位前來咨詢。
掃一掃，關注我們！
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 技術文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設計制作，未經(jīng)允許翻錄必究. 聯(lián)系人：錢經(jīng)理 聯(lián)系電話：18221656311 ICP備案號：滬ICP備11004148號-11
總訪問量：7912987 管理登錄
主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，裸鼠ELISA試劑盒，倉鼠ELISA試劑盒，標準品，培養(yǎng)基和生物試劑等
