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細(xì)胞因子溶解方法

細(xì)胞因子中不含載體蛋白（Carrier Protein）或其他添加劑（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以*少量的鹽來(lái)進(jìn)行凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過(guò)程中會(huì)沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見(jiàn)的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開(kāi)蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底（此時(shí)能否見(jiàn)到白色沉淀均屬正�，F(xiàn)象）。

1．離心：高速離心 （10, 000 rpm） 20-30 秒，或低速離心 （2, 000 rpm） 5 分鐘。

2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據(jù)說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行選擇）溶解至說(shuō)明書(shū)要求的濃度 （一般為 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的產(chǎn)品，需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解）。溶解時(shí)不可振蕩，避免因化學(xué)鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當(dāng)?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時(shí)間，待細(xì)胞因子完全溶解后使用。
溶劑的選擇：
1）要求用去離子水溶解的產(chǎn)品，務(wù)必不可用鹽溶液，避免過(guò)高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出；

2） 要求用鹽溶液溶解的產(chǎn)品，請(qǐng)依照說(shuō)明書(shū)上的濃度，同樣也是為了避免過(guò)高的鹽濃度。

3．分裝和貯存（Aliquot ａnd Storage）：蛋白溶解后可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步稀釋成工作液，稀釋可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液，其中含有5-10%的FCS （小牛或胎牛血清）或0.5 %的BSA（牛血清白蛋白）來(lái)穩(wěn)定蛋白。工作液在4℃可保存1周，如需長(zhǎng)期保存，則需分裝凍存于-20℃ （注意：不可凍存于-80℃）。分裝時(shí)每管中工作液的體積是一次實(shí)驗(yàn)的用量，以實(shí)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)用完一只工作液，避免反復(fù)凍融引起蛋白活性的降低。

上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司始終致力于為生命科學(xué)研究開(kāi)發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品，如今已成為能提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白，相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體，以及ELISA試劑盒的世界領(lǐng)導(dǎo)者。
上海恒遠(yuǎn)產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、腫瘤壞死因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。 為跟蹤當(dāng)今科研發(fā)展、滿(mǎn)足日益增長(zhǎng)的需求，上海恒遠(yuǎn)研制出無(wú)動(dòng)物成分的重組蛋白 。這些蛋白是利用專(zhuān)有的無(wú)動(dòng)物成分生產(chǎn)設(shè)施，在嚴(yán)格的無(wú)動(dòng)物成分條件下生產(chǎn)出來(lái)，因此痕量的動(dòng)物源性污染引發(fā)潛在問(wèn)題的可能性被降至，從而完全達(dá)到臨床前研究和細(xì)胞治療用標(biāo)準(zhǔn)。此外，上海恒遠(yuǎn)*新還開(kāi)發(fā)出無(wú)動(dòng)物成分的培養(yǎng)基添加物試劑盒 。這些試劑盒經(jīng)改良設(shè)計(jì)，其中的無(wú)血清組分對(duì)多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)有更好的維持能力。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司